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    共表達(dá)抗原的工作

    發(fā)布時(shí)間: 2024-05-23  點(diǎn)擊次數(shù): 656次

    抗原間的相互關(guān)系分為三種,分別是互斥關(guān)系、子代與親代的關(guān)系和共表達(dá)關(guān)系。


    互斥關(guān)系是指兩種抗原不會(huì)同時(shí)表達(dá)在一中細(xì)胞上,即表達(dá)A不表達(dá)B,表達(dá)B不表達(dá)A。配色時(shí),互斥的抗原是允許熒光溢漏的。


    子代與親代關(guān)系是指抗原之間是上下級(jí)關(guān)系,即下級(jí)抗原是在上級(jí)抗原的基礎(chǔ)上進(jìn)行分析的。


    共表達(dá)關(guān)系是指兩種抗原同時(shí)表達(dá)在一種細(xì)胞上。配色時(shí),共表達(dá)抗原要搭配熒光干擾較小的熒光素,盡量避免熒光溢漏。


    什么樣的抗原屬于共表達(dá)抗原呢?以Treg細(xì)胞為例,Treg細(xì)胞同時(shí)表達(dá)CD25和Foxp3,那么CD25和Foxp3就屬于共表達(dá)關(guān)系。在這種情況下,CD25和Foxp3需要搭配相互之間沒有溢漏的熒光素,比如搭配APC和PE,因?yàn)檫@兩個(gè)熒光素是幾乎沒有干擾的,因此可獲得預(yù)期的數(shù)據(jù)結(jié)果。


    在多色流式實(shí)驗(yàn)中,如果兩個(gè)共表達(dá)Marker使用的熒光染料之間干擾較嚴(yán)重,則會(huì)對(duì)圈門造成干擾,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。雖然我們也能通過調(diào)節(jié)補(bǔ)償來減少光譜重疊的影響,但對(duì)被干擾通道熒光靈敏度降低的影響是無法通過后續(xù)的結(jié)果分析來消除的。

    共表達(dá)抗原的工作共表達(dá)抗原的工作


    圖2. 熒光干擾的影響


    如果共表達(dá)抗原之間有嚴(yán)重?zé)晒飧蓴_會(huì)怎么樣呢?那結(jié)果就可能出現(xiàn)如上圖右所示的情況,雖然進(jìn)行了補(bǔ)償調(diào)節(jié),但得到的目的細(xì)胞的比例跟實(shí)際有差別。




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