亚洲日韩乱码中文无码蜜桃臀,无码人妻久久一区二区三区不卡,把高冷校花压在桌上进进出,国产亚洲精品久久久久久国模美

銷售熱線

19126518388
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 分享染色質免疫共沉淀的方法

    分享染色質免疫共沉淀的方法

    發(fā)布時間: 2021-09-13  點擊次數: 1992次

    目前,不斷發(fā)展的DNA和蛋白質相互作用的方法和技術已經成為研究DNA復制、重組、修復和轉錄的核心。今天跟大家分享的是花樣百出、拽酷炫的染色質免疫共沉淀的方法!

    染色質免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,  CHIP)原理

    值得注意的是,它是目前*個研究體內 DNA與蛋白質相互作用的方法。在生理狀態(tài)下,把細胞內的 DNA 與蛋白質交聯在一起,通過超聲或酶處理將染色質切為小片段后,利用抗原抗體的特異性識別反應,將與目的蛋白相結合的 DNA 片段沉淀下來,以富集存在組蛋白修飾或者轉錄調控的 DNA 片段,再通過多種下游檢測技術(定量 PCR、基因芯片、測序等)來檢測此富集片段的 DNA 序列。

    染色質免疫共沉淀技術包括 3 個獨立的步驟,即固定、沉淀和檢測。

    第 1 步為固定,即在體內用甲醛固定 DNA 和蛋白質復合物,然后用化學(微球菌酶)或者機械(超聲波)的手段將其隨機切成一定長度的染色質小片段(200~1000bp)。

    第 2 步為免疫沉淀,即利用目的蛋白質或者目的蛋白質上標簽的特異性抗體,通過抗原和抗體反應形成 DNA-蛋白質-抗體復合體,然后沉淀此復合體,特異性地富集目的蛋白結合的 DNA 片段。

    第 3 步為目的片段的純化與檢測,即經過熱處理解交聯,釋放共沉淀的 DNA;再將 DNA 片段純化后,對沉淀的 DNA 樣品進行檢測。


    目前檢測方法主要有 3 種:

    染色質免疫共沉淀-qRT(ChIP-qRT)

    第 1 種是比較沉淀的模版與陰性和陽性對照信號強度的相對精確的定量 PCR 方法。有關這個方法,跟其他兩種相比,只想送給愛學習愛動手的小伙伴四個字:成本較低!


    染色質免疫共沉淀芯片雜交(ChIP-chip)

    ChIP 和 DNA 微陣列芯片技術的結合是一種高通量分析 DNA 和蛋白質結合或者翻譯后染色質/組蛋白修飾的方法。具體方法是:將經過染色質免疫共沉淀的 DNA 樣品純化后進行 PCR 擴增,然后用熒光素標記(如 Cy3)。對沒有經過免疫沉淀反應富集的 Input DNA 樣品也進行擴增,并且用另一種熒光素標記(如 Cy5),作為結合背景的參照。之后將這兩種 DNA 雜交于包括基因組序列的微陣列芯片上,轉錄因子結合的靶序列用每個點相應的熒光強度來確定。


    染色質免疫共沉淀測序法(ChIP-seq)

    在測序深度和范圍足夠的情況下, ChIP-seq 可以檢測到所有的組蛋白修飾所對應的 DNA  結合位點。ChIP-seq 首先通過染色質免疫共沉淀技術特異地富集目的蛋白結合的 DNA 片段, 并對其進行純化與文庫構建,然后以 NGS 技術對富集到的 DNA 片段進行高通量測序。

    【NGS 技術主要是利用 DNA 新模板的合成或連接過程, 用高效平行的方式同時對 DNA 模板進行測序, 從而獲得大量的測序數據, 即所謂的大規(guī)模平行測序?!?/p>


    盡管染色質免疫共沉淀看上去似乎很高大上,但真正掌握其原理和方法之后其實也不難。何況它的后續(xù)檢測并不都是 chip 和 seq 這些高消費的方法,也可以采用接地氣的 qRT-PCR,小伙伴們可根據自己的情況作出選擇。






產品中心 Products
宝贝把奶露出来H| 国产无人区玫瑰香水| 一本一道波多野结衣AV中文| 欧美日韩一区二区| 翁想房中春意浓1-28| 一女被两根凶猛挺进动态图| 亚VA芒果乱码一二三四区别| 国产真实偷人视频| 中文无码AV一区二区三区| 国产女人被狂躁到高潮小说| 午夜精品A片一区二区三区| 久久精品一区二区三区四区| 亚洲精品无码AV人在线观看国产 | 草草浮力影院| 精品一区二区三区在线成人| 护士猛少妇色XXXXX猛叫| 做床爱视频真人版无遮挡免费| 亚洲香蕉中文日韩V日本国产| 久久久亚洲AV波多野结衣| 妈妈的朋友6| 熟妇人妻无乱码中文字幕| 欧美又大粗又爽又黄大片视频 | 国产多p交换视频| 罚女仆夹震蛋器憋尿虐乳网站| av无码一区二区三区| 白洁少妇1~178无删节| 亚洲一本色道中文无码av| 大叫受不了了好爽国产 | 亚洲AV午夜福利精品一区| 业余 自由 性别 成熟偷窥| 性做久久久久久免费观看 | 母亲とが话しています免费| 免费人成在线观看网站| 精品一区二区三区免费视频| 免费看国产曰批40分钟| 国模少妇一区二区三区咪咕| 久久精品卫校国产小美女| 久久久久人妻一区精品色欧美| 一个人看的www免费视频| 久久久久久久亚洲AV无码| 国产亚州精品女人久久久久久|